濾光片的原理、種類和選型
濾（lǜ）光片是在塑料或玻璃基材中加入特種染料（liào）或在其表麵蒸鍍光學膜（mó）製成,用以衰減（吸收（shōu））光波中的某些光波段或以精確選擇小範圍波段光波通過，
而反射（或吸收）掉其他（tā）不希望通過的波段。通過改變濾光片的結構和膜層的光學（xué）參數，可以獲（huò）得各種（zhǒng）光譜特（tè）性，使濾（lǜ）光片可以控製、
調整和改變光波的透射（shè）、反射、偏振或相位狀態。濾光片的分類方法一般式按光譜波段、光譜特（tè）性、膜層材料、應用特點等特（tè）性進（jìn）行分類。
濾光片按（àn）照光譜特性分（fèn）類可以分為帶通濾（lǜ）光片（如NBF-808,BPF940等）截止濾光片（如IBG-650)、二向分（fèn）光濾光片（piàn）（如半透半反鏡）、
中性密度濾光片、反射濾光片等；濾光片按照光譜波段分類（lèi）可以分為紫外波（bō）段濾光片、可見光濾光片和紅外波段濾光（guāng）片；
濾光片按照應用膜層（céng）材料分類（lèi）可以分（fèn）為軟膜濾光（guāng）片和硬膜濾光片（piàn）；濾光片按照應用（yòng）特點分類可以分為醫用生化儀用濾光片、
熒（yíng）光顯微鏡用濾光片、警用多波（bō）段硬膜濾光片等（děng）。
本文所談的濾光片指的是各種熒光濾光片，濾（lǜ）光片一般（bān）用於各種顯（xiǎn）微鏡中，使人們能夠更方（fāng）便的（de）觀測各種熒光現象。
濾光片通常用到（dào）的顯微鏡有（yǒu）熒光顯微鏡、
激光掃描（miáo）共聚焦熒光顯微（wēi）鏡（jìng）（LSCM）、共聚焦顯微鏡、和全內反射熒光顯微鏡（TIRFM）。
濾光片的分類方法：根據使用目的的不同，濾光片可分為TIRF濾光片、幹涉濾光片、全內反射濾（lǜ）光片、Raman濾光片、拉曼濾光片、
FISH熒光（guāng）濾光片和應原位雜交濾光片。根據（jù）濾光片本身功能的（de）不同，其可分（fèn）為激發（fā）濾光（guāng）片、發（fā）射（shè）濾（lǜ）光片、二向色（sè）鏡（jìng）/二向色濾光片（piàn）/
二色鏡、陷波濾光片、燃（rán）料濾光（guāng）片、熒光素（sù）濾光片、ND濾光片、中性（xìng）濾光片、中性灰（huī）度鏡、截止濾光片、高通濾光（guāng）片、低（dī）通濾光片、
帶通濾光片、紫（zǐ）外濾光片和UV濾光片。
根據主要應用領域，濾光片又可分為生物（wù）濾光片、醫學濾光片和天文學濾光片。
熒光濾光片
用於（yú）生命科學（xué）和（hé）生物醫學領域，主要作用是在生物醫學熒光檢驗分（fèn）析係統中分離和選擇物質的激發光與發射熒光的特征波段光譜。
中（zhōng）性灰度（dù）鏡，ND，濾光片，中性灰度鏡（neutraldensityfilter）又叫中灰密度鏡，其作用是均勻地過濾光線。這種濾光作用是非選
擇性（xìng）的，也就是說，ND鏡對各種不同（tóng）波長的光線的（de）減少能力是同等的、均勻（yún）的，而對（duì）原物體的顏色不會產生任何影響，可以真實
再現景物的反差。熒光原位雜交（jiāo）濾光片，FISH濾光片
熒光原位雜（zá）交技術（Fluorescenceinsituhybridization,FISH）是根據（jù）已知微生物不同分類級別上種群（qún）特異（yì）的DNA
序列，以利用熒光（guāng）標記的特異寡聚核苷酸片段作為探針，與環境基因組中DNA分子（zǐ）雜交，檢（jiǎn）測該特異微生物種群
的存在與豐度。陷波濾光片，Notch濾（lǜ）光片陷波濾光片通常用於拉曼光（guāng）譜測試（shì）。通常也被稱作帶阻或者帶抑製（zhì）濾光（guāng）片。
它可以透過絕大多（duō）數波長，但是（shì）將特定波長範圍內（阻帶）的光衰（shuāi）減（jiǎn）到非常低的水平。全內反射濾光片，TIRF濾光片，
全內反射熒光法濾光片用（yòng）於全內反射熒光法顯微鏡，利用全（quán）內反射產（chǎn）生的隱失波照明樣品
使照明區（qū）域限定在樣（yàng）品表麵的一（yī）薄層範（fàn）圍內，從而觀測到非常不易察覺的現（xiàn）象。優秀濾光片的特征：
1.和燃料的激發峰、發射峰匹配，且（qiě）交疊小
2.截止深度（dù）深
3.自發熒（yíng）光小
4.透鏡麵形好，利於熒（yíng）光成像的提取。如果透鏡表（biǎo）麵的平整（zhěng）度不好，則會產生（shēng）波前扭矩（jǔ）或楔角，波（bō）前扭矩會改變聚焦或成像位置，
一般透射波前扭（niǔ）矩（TWD）比反射波前扭矩（RWD）對成像的影響更加直接，也會有更嚴格的要（yào）求。
濾光片的原理：
熒光濾光片（piàn）一般采用單片無色（sè）透（tòu）明的玻璃作為（wéi）基底，
在玻璃的兩個表麵（miàn）鍍膜。
增反膜的厚度會選（xuǎn）擇為（wéi）半波長的整（zhěng）數倍，此時反射疊加增強；增透（tòu）膜的厚度為1/4波長的倍（bèi）數，此時（shí）投射疊加增強。濾（lǜ）光片的激發和成（chéng）像方式
熒光濾光片的激（jī）發和成像方式大體可分為如下三種（zhǒng）：聚焦型：入射激（jī）發光聚焦在待測樣品上；寬場型：入射激發光束以較大的麵積打到樣（yàng）品（pǐn）上（shàng）
全內（nèi）反射型（TIRF）：激發光（guāng）透過樣品，觀測倏逝波成像
